一種在生物樣本中定量NMN的科學方法
1. 簡介
補充煙醯胺單核苷酸(NMN)以加強關卡的煙醯胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)已被證實是一種有前景的抗老化介入措施。然而,它依然是準確度極高的挑戰量化NAD+中間體, NMN 特別是。本研究能引入一種新穎方法——雙同位素介導的LC-MS/MS方法(dimeLC-MS/MS),用於精確量化NMN 在生物樣本中.2. 影響NMN準確檢測的因素
NMN因對酵素敏感而難以準確檢測降解、樣本處理中的轉換、不同柱與萃取條件下的複雜行為,以及基質效應。
具體來說,NMN具有高極性和低揮發性的特性,容易溶於水,但難以溶解於有機溶劑中。這些特性大大限制了許多傳統定量分析方法的應用。
B生物學樣本例如:血液中攜帶顯著的CD38和CD73活性(ecto-5’-核苷酸酶),兩者皆可利用NMN作為底物。
NMN在柱中的行為非常複雜,可能是因為其電荷具有二分分度,萃取與柱狀條件的細微差異會顯著影響NMN的可靠與準確檢測。
3. 應對策略二分之一 LC-MS/MS以減少影響因子的影響
為避免上述因素的干擾,p回轉版柱狀NMN-2是應用的。本欄包含s基於C18的高純度二氧化矽顆粒這些化合物比碳粒子更能結合親水性化合物,提升分離能力。P氯酸(PCA)被使用,因為它可以高效萃取NAD+ 以及從生物樣本如血漿中提取的NMN,且 損失.
為了調整矩陣效應,a固定量(1 微米)各有 同位素化合物is 加入至生物學PCA萃取前的樣品.
4. 優勢s一二 LC-MS/MS
D弱同位素NMN標準, NMN(M + 14)與NMN(M + 5)在LC-MS/MS驅動方法中,能精確追蹤NMN在樣品處理過程中的命運,顯著提升生物樣本中NMN測量的準確度與可靠性.此外,dimeLC-MS/MS可評估不同生物樣本中NMN的萃取效率及絕對濃度。
5. 結論
Th是新型LC-MS/MS-雙同位素NMN標準的驅動方法論 可以Accura特利以及 Reliably測量生物樣本中的NMN。 未來可用於核磁性神經媒介(NMN)攝取的研究。6. 參考資料
Unno, Junya 等。「利用雙同位素介導液相層析串列質譜(dimeLC-MS/MS)在生物樣本中絕對定量尼古丁醯胺單核苷酸。」npj aging vol. 10,1 2.2024年1月2日,doi:10.1038/s41514-023-00133-1為什麼選擇邦塔克?

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