超敏ELISA結合Thio-NAD循環在判定登革熱NS1蛋白上的卓越價值
1. 簡介
登革熱是一種急性傳染病，由登革熱病毒透過感染的伊蚊（Ae. aegypti 或 Ae. albopictus）蚊子叮咬，主要症狀包括高燒、頭暈、頭痛、皮疹及嚴重 疼痛（眼睛、肌肉、關節或骨頭疼痛）等等。此病在熱帶及亞熱帶氣候中廣泛流行。估計每年有1億至4億人感染，其中超過80%通常為輕微且無症狀。然而，若未妥善治療，嚴重的登革熱會增加死亡風險。因此，早期診斷此病對及時治療至關重要。值得注意的是，非結構蛋白1（NS1）是一種高度保守的糖蛋白，主要在感染登革熱病毒，被廣泛認為是 的主要致病因子登革熱.因此，NSI通常被用作早期偵測此疾病的生物標記。
本研究採用夾心酵素連結免疫吸附分析 (伊莉莎) 結合硫胺酸煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（THIO-NAD/S-NAD）循環方法 （以下稱為超敏感ELISA）用於偵測NSI，接著與NAAT比較以確認其偵測準確度。
2. 傳統檢測方法的優缺點登革熱
目前，以下是四種主要的偵測方法對於 登革熱。
病毒分離 鑑定具有高度特異性，但耗時，至少需5天。該 快速抗原 測試是所有方法中最快且最具成本效益的，但靈敏度 特異性相對較低。基於IgM和IgG的血清學檢測有以下限制 感染天數，為該檢測必須延後，直到抗體濃度達到 會升到可偵測的程度。
在臨床上，NAAT常被用來判斷登革熱 由於其高度靈敏度與特異性。然而，這種方法昂貴、繁瑣，且容易產生虛假的正面態度，必須由受過訓練的人員親自執行。為了克服這些方法的缺點，採用了新的偵測方法超敏感ELISA是 應用於本研究。
3. 超靈敏ELISA搭配硫代-NAD循環的工作流程
一對抗體是用於捕捉三明治中的NS1蛋白ELISA及鹼性磷酸酶是標記在次級抗體上。除了抗體外，還有一種雄性固醇衍生物、3α-羥類固醇脫氫酶、硫代-NAD和NADH是用於構建硫代-NAD酶循環系統。在 thio-NAD 循環反應中，thio-NADH 會以三角形數形式持續累積，且可直接測量到吸收率為 405 nm.
4. 超靈敏ELISA與NAAT在登革熱NS1蛋白檢測中的比較
在NAAT中，有60個標本為登革熱陽性，25個為登革熱陰性。這些登革熱陽性樣本的NAAT循環閾值（CT）範圍為12.42至31.41。在超靈敏ELISA中，59個標本對NAAT結果呈陽性，25個標本完全對應陰性。與NAAT相比，超靈敏ELISA的靈敏度與特異度分別為98.3%與100%（見表2）。在60名經NAAT確認的登革熱陽性患者標本中，只有1個標本在超敏感ELISA中呈陰性。NAAT資料顯示該標本為4型DENV感染病例，CT值為21.59。超靈敏ELISA的結果幾乎與NAAT結果完全一致，Kappa值為0.972（95%信賴區間：0.917-1.0).
5. 結論
Ultrasensitive ELISA 方法操作簡便，且不需專業實習生操作.T在收到少量樣本後，即可立即開始偵測。它特別適合早期偵測登革熱疾病低收入國家.參考資料
Chen， Po-Kai 等人。「利用超靈敏ELISA結合Thio-NAD循環的登革熱NS1蛋白先進檢測方法。」《病毒》第15卷第9期，1894年。2023年9月8日，doi：10.3390/v15091894產品優點與特色邦塔克 Thio-NAD/S-NAD
邦塔克 是 o少數企業之一中國能產生Thio-NAD， ，「Bonzyme」 全酵素方法 (環保;無有害溶劑殘留物） 獨特的「Bonpure」七步淨化技術。BONTAC 整合了研發、生產與銷售，並 自有工廠及多項國際認證，確保產品品質與穩定供應.
